L'ADN purifié peut être directement utilisé dans diverses opérations conventionnelles, y compris la digestion enzymatique, la PCR, la construction de bibliothèques, le transfert de Southern et d'autres expériences.
■ Déparaffinage en machine : les étapes de déparaffinage et d'extraction peuvent être effectuées automatiquement en plaçant simplement des échantillons non traités enrobés de paraffine dans la cartouche de réactifs, puis en ajoutant de l'huile de sula et de la protéinase K.
■ Résultats fiables : L'ADN génomique obtenu est exempt de contamination par l'ARN et les protéines et peut être directement utilisé pour la PCR ou la PCR quantitative par fluorescence.
■ Sûr et inoffensif : les solvants organiques nocifs pour le corps humain tels que le phénol chloroforme ne sont pas nécessaires.
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Les résultats ont montré que pour des échantillons de grand volume, les rendements d'extraction des deux méthodes étaient comparables ; pour les échantillons de volume moyen et petit, le rendement de la méthode de déparaffinage en une étape (effectuer avec TGuide) était supérieur à celui de la méthode de déparaffinage classique. Par conséquent, la méthode de déparaffinage en une étape simplifie non seulement l'opération, réduit le risque, mais améliore également l'efficacité d'extraction. Noter: Échantillon de grand volume : la zone de coupe est comprise entre 2,5 et 4 cm2 et l'épaisseur est comprise entre 5 et 20 µm. Échantillon de volume moyen : la zone de coupe est comprise entre 1,5 et 2,5 cm2 et l'épaisseur est comprise entre 5 et 20 µm. Échantillon de petit volume : la zone de coupe est comprise entre 0,2 et 1,5 cm2 et l'épaisseur est comprise entre 5 et 20 µm. |
A-1 Faible concentration de cellules ou de virus dans l'échantillon de départ —Enrichir la concentration de cellules ou de virus.
A-2 Lyse insuffisante des échantillons —Les échantillons n'ont pas été bien mélangés avec le tampon de lyse. Il est suggéré de bien mélanger par pulsation au vortex pendant 1 à 2 fois. — Lyse cellulaire insuffisante causée par la diminution de l'activité de la protéinase K. — Lyse cellulaire insuffisante ou dégradation des protéines en raison d'un temps de bain chaud insuffisant. Il est suggéré de couper le tissu en petits morceaux et de prolonger la durée du bain pour éliminer tous les résidus du lysat.
A-3 Adsorption d'ADN insuffisante. —Aucun éthanol ou un faible pourcentage au lieu de 100 % d'éthanol n'a été ajouté avant le transfert du lysat dans la colonne de centrifugation.
A-4 La valeur du pH du tampon d'élution est trop faible. —Ajustez le pH entre 8,0 et 8,3.
Éthanol résiduel dans l'éluant.
—Il y a du tampon de lavage PW résiduel dans l'éluant. L'éthanol peut être éliminé en centrifugant la colonne de centrifugation pendant 3 à 5 min, puis en la plaçant à température ambiante ou dans un incubateur à 50 °C pendant 1 à 2 min.
A-1 L'échantillon n'est pas frais. —Extraire un échantillon d'ADN positif comme contrôle pour déterminer si l'ADN de l'échantillon s'est dégradé.
A-2 Prétraitement inapproprié. —Causé par un broyage excessif d'azote liquide, une reprise d'humidité ou une trop grande quantité d'échantillon.
Les prétraitements doivent varier pour différents échantillons. Pour les échantillons de plantes, assurez-vous de bien les broyer dans de l'azote liquide. Pour les échantillons d'animaux, homogénéiser ou broyer soigneusement dans de l'azote liquide. Pour les échantillons dont les parois cellulaires sont difficiles à briser, comme les bactéries G+ et les levures, il est suggéré d'utiliser le lysozyme, la lyticase ou des méthodes mécaniques pour briser les parois cellulaires.
Le kit d'ADN génomique végétal 4992201/4992202 adopte une méthode sur colonne qui nécessite du chloroforme pour l'extraction. Il est particulièrement adapté à divers échantillons de plantes, ainsi qu'à la poudre sèche de plantes. Le kit de plantes Hi-DNAsecure est également basé sur une colonne, mais ne nécessite aucune extraction au phénol/chloroforme, ce qui le rend sûr et non toxique. Il convient aux plantes à haute teneur en polysaccharides et en polyphénols. 4992709/4992710 DNAquick Plant System adopte une méthode à base de liquide. L'extraction au phénol/chloroforme n'est pas non plus nécessaire. La procédure de purification est simple et rapide, sans limite pour les quantités de départ de l'échantillon, de sorte que les utilisateurs peuvent ajuster la quantité de manière flexible en fonction des exigences expérimentales. Des fragments d'ADNg de grande taille peuvent être obtenus avec un rendement élevé.
L'extraction d'ADN de caillot sanguin peut être effectuée à l'aide des réactifs fournis dans ces deux kits en changeant simplement le protocole pour les instructions spécifiques pour l'extraction d'ADN de caillot sanguin. La copie électronique du protocole d'extraction d'ADN de caillot sanguin peut être délivrée sur demande.
Suspendre l'échantillon frais avec 1 ml de PBS, une solution saline normale ou un tampon TE. Homogénéiser complètement l'échantillon à l'aide d'un homogénéisateur et recueillir le précipité au fond d'un tube par centrifugation. Jeter le surnageant et remettre en suspension le précipité avec 200 ul de tampon GA. La purification d'ADN suivante peut être effectuée selon les instructions.
Pour la purification de l'ADNg dans les échantillons de plasma, de sérum et de fluide corporel, le kit TIANamp Micro DNA est recommandé. Pour la purification de l'ADNg du virus à partir d'échantillons de sérum/plasma, le kit TIANamp Virus DNA/RNA est recommandé. Pour la purification de l'ADNg bactérien à partir d'échantillons de sérum et de plasma, le kit TIANamp Bacteria DNA est recommandé (le lysozyme doit être inclus pour les bactéries positives). Pour les échantillons de salive, les kits Hi-Swab DNA et TIANamp Bacteria DNA sont recommandés.
Le kit de plantes DNAsecure ou le système de plantes DNAquick sont recommandés pour l'extraction du génome fongique. Pour l'extraction du génome de la levure, le kit TIANamp Yeast DNA est recommandé (la lyticase doit être auto-préparée).
Depuis sa création, notre usine a développé des produits de première classe mondiale en respectant le principe
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