TGuide S96 Sang/Cellule/Tissu ARN Kit

A-1 Lyse ou homogénéisation cellulaire insuffisante

---- Réduisez l'utilisation de l'échantillon, augmentez la quantité de tampon de lyse, augmentez l'homogénéisation et le temps de lyse.

A-2 La quantité d'échantillon est trop grande

---- Réduisez la quantité d'échantillon utilisée ou augmentez la quantité de tampon de lyse.

A-1 Lyse cellulaire ou homogénéisation insuffisante

---- Réduisez l'utilisation de l'échantillon, augmentez la quantité de tampon de lyse, augmentez l'homogénéisation et le temps de lyse.

A-2 La quantité d'échantillon est trop grande

----Veuillez vous référer à la capacité de traitement maximale.

L'ARN A-3 n'est pas complètement élué de la colonne

---- Après avoir ajouté de l'eau sans RNase, laissez-la pendant quelques minutes avant de centrifuger.

A-4 Ethanol dans l'éluant

---- Après rinçage, centrifuger à nouveau et éliminer le plus possible le tampon de lavage.

A-5 Le milieu de culture cellulaire n'est pas complètement éliminé

---- Lors de la collecte des cellules, veuillez vous assurer de retirer le milieu de culture autant que possible.

A-6 Les cellules stockées dans RNAstore ne sont pas centrifugées efficacement

----La densité de RNAstore est supérieure au milieu de culture cellulaire moyen; donc la force centrifuge doit être augmentée. Il est suggéré de centrifuger à 3000x g.

A-7 Faible teneur en ARN et abondance dans l'échantillon

---- Utilisez un échantillon positif pour déterminer si le faible rendement est causé par l'échantillon.

A-1 Le matériau n'est pas frais

---- Les tissus frais doivent être stockés dans de l'azote liquide immédiatement ou immédiatement placés dans le réactif RNAstore pour assurer l'effet d'extraction.

A-2 La quantité d'échantillon est trop grande

---- Réduire la quantité d'échantillon.

A-3 Contamination par la RNasen

----Bien que le tampon fourni dans le kit ne contienne pas de RNase, il est facile de contaminer la RNase pendant le processus d'extraction et doit être manipulé avec précaution.

A-4 Pollution par électrophorèse

---- Remplacez le tampon d'électrophorèse et assurez-vous que les consommables et le tampon de chargement sont exempts de contamination par la RNase.

A-5 Trop de charge pour l'électrophorèse

---- Réduisez la quantité de chargement d'échantillon, le chargement de chaque puits ne doit pas dépasser 2 g.

A-1 La quantité d'échantillon est trop grande

---- Réduire la quantité d'échantillon.

A-2 Certains échantillons ont une teneur élevée en ADN et peuvent être traités avec de la DNase.

---- Effectuez un traitement à la DNase sans RNase sur la solution d'ARN obtenue, et l'ARN peut être directement utilisé pour des expériences ultérieures après le traitement, ou peut être purifié davantage par des kits de purification d'ARN.

Pour les verreries, cuites à 150°C pendant 4 h. Pour les récipients en plastique, immergé dans 0,5 M NaOH pendant 10 min, puis soigneusement rincé avec de l'eau sans RNase, puis stérilisé pour éliminer complètement la RNase. Les réactifs ou solutions utilisés dans l'expérience, en particulier l'eau, doivent être exempts de RNase. Utilisez de l'eau sans RNase pour toutes les préparations de réactifs (ajoutez de l'eau dans une bouteille en verre propre, ajoutez du DEPC à une concentration finale de 0,1% (V/V), agitez pendant la nuit et autoclave).