Réactif universel TRNzol
Caractéristiques
■ Grande flexibilité : Gamme sauvage de volume d'échantillon de départ, adaptée à l'extraction d'échantillons de grand volume en une seule réaction.
■ Haut rendement : La méthode de précipitation maximise le rendement d'ARN dans l'échantillon.
■ Large utilisation : convient à de nombreux échantillons différents tels que les tissus végétaux et animaux, les cellules cultivées, le sang, les fluides corporels, etc.
■ Opération rapide : l'ADN génomique peut être obtenu en 1 heure.
spécification
Taper: Basé sur les précipitations
Échantillon: Virus, bactéries, champignons, animaux, tissus végétaux, cellules cultivées et fluides corporels.
Cible: ARN
Moment de l'opération: ~1 heure
Applications: Le réactif TRNzol Universal minimise la contamination des impuretés telles que l'ADN et les protéines dans l'ARN total purifié, et peut être directement utilisé pour diverses expériences de biologie moléculaire telles que Northern Blot, Dot Blot, dépistage PolyA, traduction in vitro, analyse de protection RNase, construction de bibliothèque d'ADNc , RT-PCR, PCR en temps réel et séquençage haut débit.
Tous les produits peuvent être personnalisés pour ODM/OEM. Pour plus de détails,s'il vous plaît cliquez sur Service personnalisé (ODM/OEM)
Méthode : 30 mg de tissu de foie de rat, 100 mg de feuilles de riz ont été collectés par broyage à l'azote liquide ; 1×106Les cellules cultivées HepG2 et 700 µl de milieu de culture Saccharomyces Cerevisiae (DO600 = 0,9) ont été collectés par centrifugation. 1 ml de TRNzol Universal Reagent de TIANGEN et les produits pertinents du fournisseur L et T ont été ajoutés à chaque aliquote d'échantillon et l'extraction de l'ARN a été réalisée selon les protocoles fournis par chaque fournisseur. Le volume d'élution était de 80 l, 50 l, 30 l et 30 l pour les quatre échantillons respectivement. 3 µl de l'éluat ont été chargés par piste.
MIII : Marqueur TIANGEN III ;
L'électrophorèse a été réalisée à 6 V/cm pendant 30 min sur un agarose à 1%.
Résultats : Le réactif universel TIANGEN TRNzol peut extraire de l'ARN de haute pureté et de bonne intégrité à partir de foie de rat, de feuilles de riz, de cellules en culture et d'échantillons de levure, avec une grande efficacité. La qualité de l'ARN est comparable ou légèrement supérieure à celle des produits des fournisseurs L et T.
A-1 Lyse ou homogénéisation cellulaire insuffisante
---- Réduisez l'utilisation de l'échantillon, augmentez la quantité de tampon de lyse, augmentez l'homogénéisation et le temps de lyse.
A-2 La quantité d'échantillon est trop grande
---- Réduisez la quantité d'échantillon utilisée ou augmentez la quantité de tampon de lyse.
A-1 Lyse cellulaire ou homogénéisation insuffisante
---- Réduisez l'utilisation de l'échantillon, augmentez la quantité de tampon de lyse, augmentez l'homogénéisation et le temps de lyse.
A-2 La quantité d'échantillon est trop grande
----Veuillez vous référer à la capacité de traitement maximale.
L'ARN A-3 n'est pas complètement élué de la colonne
---- Après avoir ajouté de l'eau sans RNase, laissez-la pendant quelques minutes avant de centrifuger.
A-4 Ethanol dans l'éluant
---- Après rinçage, centrifuger à nouveau et éliminer le plus possible le tampon de lavage.
A-5 Le milieu de culture cellulaire n'est pas complètement éliminé
---- Lors de la collecte des cellules, veuillez vous assurer de retirer le milieu de culture autant que possible.
A-6 Les cellules stockées dans RNAstore ne sont pas centrifugées efficacement
----La densité de RNAstore est supérieure au milieu de culture cellulaire moyen; donc la force centrifuge doit être augmentée. Il est suggéré de centrifuger à 3000x g.
A-7 Faible teneur en ARN et abondance dans l'échantillon
---- Utilisez un échantillon positif pour déterminer si le faible rendement est causé par l'échantillon.
A-1 Le matériau n'est pas frais
---- Les tissus frais doivent être stockés dans de l'azote liquide immédiatement ou immédiatement placés dans le réactif RNAstore pour assurer l'effet d'extraction.
A-2 La quantité d'échantillon est trop grande
---- Réduire la quantité d'échantillon.
A-3 Contamination par la RNasen
----Bien que le tampon fourni dans le kit ne contienne pas de RNase, il est facile de contaminer la RNase pendant le processus d'extraction et doit être manipulé avec précaution.
A-4 Pollution par électrophorèse
---- Remplacez le tampon d'électrophorèse et assurez-vous que les consommables et le tampon de chargement sont exempts de contamination par la RNase.
A-5 Trop de charge pour l'électrophorèse
---- Réduisez la quantité de chargement d'échantillon, le chargement de chaque puits ne doit pas dépasser 2 g.
A-1 La quantité d'échantillon est trop grande
---- Réduire la quantité d'échantillon.
A-2 Certains échantillons ont une teneur élevée en ADN et peuvent être traités avec de la DNase.
---- Effectuez un traitement à la DNase sans RNase sur la solution d'ARN obtenue, et l'ARN peut être directement utilisé pour des expériences ultérieures après le traitement, ou peut être purifié davantage par des kits de purification d'ARN.
Pour les verreries, cuites à 150°C pendant 4 h. Pour les récipients en plastique, immergé dans 0,5 M NaOH pendant 10 min, puis soigneusement rincé avec de l'eau sans RNase, puis stérilisé pour éliminer complètement la RNase. Les réactifs ou solutions utilisés dans l'expérience, en particulier l'eau, doivent être exempts de RNase. Utilisez de l'eau sans RNase pour toutes les préparations de réactifs (ajoutez de l'eau dans une bouteille en verre propre, ajoutez du DEPC à une concentration finale de 0,1% (V/V), agitez pendant la nuit et autoclave).
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